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15973146608
[1]本品系用特定的誘生劑誘導(dǎo)健康人白細(xì)胞，經(jīng)提取后制成的凍干干擾素注射劑。用于某些病毒性疾病和腫瘤的輔助治療，對(duì)免疫缺陷性疾病也有一定療效。
1.1制造要求
1.1.1白細(xì)胞
獻(xiàn)血員供血應(yīng)符合獻(xiàn)血員體檢及化驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。一次供血不超過400ml，供全血間隔在3個(gè)月以上。
白細(xì)胞的分離，應(yīng)在采血后48小時(shí)內(nèi)進(jìn)行。活細(xì)胞數(shù)應(yīng)達(dá)到90%以上。
1.1.2誘生病毒
采用新城疫病毒（NDV）F株或仙臺(tái)病毒，經(jīng)檢定血凝效價(jià)達(dá)到適宜滴度，方可投產(chǎn)。
1.1.3培養(yǎng)液
采用RPMI-1640，內(nèi)含適量人血清和慶大霉素或卡那霉素。不得使用β椖邗０防囁股亍Ｒ部捎悶淥室伺嘌骸?/P>
1.1.4制造工作室的設(shè)置，應(yīng)符合工藝流程要求。冷庫(kù)及各種生產(chǎn)用具，必須，嚴(yán)禁與其他異種蛋白質(zhì)混用。制造工作室建筑應(yīng)便于清潔、消毒、防霉。在制造過程中，應(yīng)采取各種有效措施，防止細(xì)菌及熱原質(zhì)污染。直接接觸制品的用具，用后應(yīng)立即洗凈，用前應(yīng)除熱原質(zhì)及滅菌處理。
1.1.5生產(chǎn)用水應(yīng)符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)，直接用于制品的水應(yīng)符合注射用水標(biāo)準(zhǔn)。所用各種化學(xué)藥品應(yīng)符合《中國(guó)生物制品主要原材料試行標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，未納入試行標(biāo)準(zhǔn)者應(yīng)不低于分析純。
1.2制造工藝
1.2.1誘生病毒
采用9～10日齡健康雞胚，于尿囊腔接種適量病毒，37℃培養(yǎng)48～72小時(shí)，雞胚發(fā)育良好，病毒達(dá)到適宜滴度后，收集尿囊液，并做無菌試驗(yàn)，合格后合并，抽樣做滴度測(cè)定，放?/FONT>20℃待用。亦可用其他適宜方法制備誘生病毒。
1.2.2 白細(xì)胞懸液
用離心法分離血漿，吸取白細(xì)胞層，用氯化銨液裂解紅細(xì)胞，或用其他適宜方法分離白細(xì)胞。然后用培養(yǎng)液稀釋，以每ml含活細(xì)胞1.0×107為宜。
1.2.3 起動(dòng)與誘生
白細(xì)胞懸液中加入少許白細(xì)胞干擾素，于37℃水浴攪拌培育2小時(shí)，加入適量誘生病毒，待干擾素效價(jià)達(dá)到zui高峰時(shí)，收集上清，即為粗制干擾素，置?/FONT>20℃保存。
1.2.4 純化
在粗制干擾素（效價(jià)應(yīng)在1.0×104IU以上）中加入硫氰酸鉀鹽析，然后分別在酸性和堿性條件下用乙醇分級(jí)沉淀，去除雜蛋白，再用硫氰酸鉀提純一次。亦可采用經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)的其他適宜方法。
1.2.5 溶解、透析或超濾
檢查硫氰酸鉀為陰性，除菌過濾后進(jìn)行半成品檢定。合格后方可分裝、凍干。
1.2.6 半成品檢定
半成品應(yīng)做理化檢查和比活性測(cè)定，比活性應(yīng)≥1.0×106IU/mg蛋白。加入人血白蛋白作保護(hù)劑后，應(yīng)做無菌試驗(yàn)、安全試驗(yàn)和熱原質(zhì)試驗(yàn)。試驗(yàn)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)同成品檢定。
1.2.7 凍干
按《人血白蛋白（低溫乙醇法）制造及檢定規(guī)程》1.2.5項(xiàng)規(guī)定進(jìn)行凍干，但制品溫度不得超過35℃。
2.1 外觀
本品應(yīng)為白色或淡黃色疏松體，加水溶解后，為無色或淡黃色澄清液體，不得有搖不散的顆粒。
2.2 化學(xué)檢定
按《生物制品化學(xué)檢定規(guī)程》進(jìn)行。
2.2.1 水分測(cè)定
水分含量應(yīng)≤3%（g/g）。
2.2.2 pH值
pH值應(yīng)為6.8～7.8。
2.2.3 硫氰酸鉀殘余量測(cè)定。
取2滴干擾素原液加2滴9%三氯化鐵溶液，不呈現(xiàn)微紅色為合格。
2.3 無菌試驗(yàn)
按《生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。每批抽樣品不少于10支。
2.4 熱原質(zhì)試驗(yàn)
按《生物制品熱 原質(zhì)試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行。每只家兔靜脈注射0.2ml（2×105IU）。判定標(biāo)準(zhǔn)按該規(guī)程4.1項(xiàng)要求進(jìn)行。
2.5 全試驗(yàn)
2.5.1 豚鼠試驗(yàn)
用體重300～400g豚鼠2只，每只腹側(cè)皮下注射干擾素1ml（1.0×106IU），觀察7天，動(dòng)特健存，每只體重增加者為合格。如不符合上述要求，用4只豚鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。
2.5.2 小白鼠試驗(yàn)
用體重18～20g小白鼠5只，每只腹腔注射干擾素0.5ml（5×105IU），半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯的異常反應(yīng)，繼續(xù)觀察7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用10只小白鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。
2.6 HBsAg檢測(cè)
每安瓿凍干制品（1ml裝）加0.1ml滅菌注射用水溶解，用敏感性為1ng/ml以下的試劑盒測(cè)定，應(yīng)為陰性。
2.7 效價(jià)測(cè)定
按附錄方法測(cè)定，應(yīng)為標(biāo)示量的80%～150%。
2.8 殘余牛血清蛋白含量測(cè)定
如采用組織培養(yǎng)法制備誘生病毒，則成品中殘余牛血清蛋白含量應(yīng)≤50ng/支。
1.0×106IU/支
應(yīng)保存于10℃以下。有效期自品效價(jià)檢定合格之日起為1.5年。
采用CPE（細(xì)胞致病效應(yīng)）抑制為基礎(chǔ)的抑制微量測(cè)定法，以每ml干擾素檢品的zui高稀釋度仍能保護(hù)半數(shù)細(xì)胞（50）免受病毒攻擊的稀釋度的倒數(shù)定為干擾素單位。以單位（IU）表示，并用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品校正結(jié)果。
3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
將新鮮傳代24～48小時(shí)的Wish細(xì)胞（人羊膜細(xì)胞）以約35萬(wàn)/ml的濃度另入96孔組織培養(yǎng)板上，每孔100μl，置37℃5%CO2孵箱中培養(yǎng)4～6小時(shí)。
干擾素檢品做4倍系列稀釋，每份檢品做6個(gè)稀釋度（如100萬(wàn)單位，則測(cè)4-12～4-7）每個(gè)稀釋度加2孔，與培養(yǎng)板中的細(xì)胞等量混合，置37℃5%CO25%CO2孵箱培養(yǎng)18～24小時(shí)。
倒掉培養(yǎng)板中的上清液，以100CCID50/ml的濃度加入VSV（水泡性口腔炎病毒），每孔100μl，37℃5%CO2孵箱培養(yǎng)24小時(shí)左右。
顯微鏡下觀察細(xì)胞病變，若病毒對(duì)照各孔細(xì)胞出現(xiàn)75%～1000%的明顯病變和死亡（變圓、死亡、脫落（，而細(xì)胞對(duì)照組中的細(xì)胞仍生長(zhǎng)良好（病變=0），則表明對(duì)照系統(tǒng)合格，結(jié)果成立。
通常可按Reed?/FONT>Muench法計(jì)算，其步驟如下：
（1）計(jì)算保護(hù)百分比
| 稀釋度 | 病變平均值（每孔） | 正常平均值（每孔） | 累積數(shù) | 比例 | 百分比（%） | |
| 病變 | 正常 | 正常/病變+正常 | ||||
| 4-1 | 0 | 4 | 0 | 13 | 13/13 | 100 |
| 4-2 | 0 | 3 | 0 | 9 | 9/9 | 100 |
| 4-3 | 1 | 2 | 1 | 5 | 5/6 | 83 |
| 4-4 | 2 | 2 | 3 | 2 | 2/5 | 40 |
| 4-5 | 4 | 0 | 7 | 0 | － | － |
| 4-6 | 4 | 0 | 11 | 0 | － | － |
（2）求出干擾素單位
距離比=（·高于50%的百分?jǐn)?shù)－50）/（高于50%的百分?jǐn)?shù)－低分50%百分?jǐn)?shù)）=（83－50）/（83－40）=33/43=0.77
即此批干擾素稀釋到4-3。77（1∶186）時(shí)能保護(hù)半數(shù)細(xì)胞免受攻擊病毒損害。此批干擾素效價(jià)為186單位，經(jīng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品修正，得出干擾素的單位（以IU表示）。
4 凍干精制人白細(xì)胞干擾素使用說明書本品系用特定誘生劑，誘導(dǎo)健康人白細(xì)胞，經(jīng)提取后制成的凍干干擾素注射劑，為白色或淡黃色疏松體，加水溶解后為無色或淡黃色澄清液體。用于某些病毒性疾病和腫瘤的輔助治療，對(duì)某些免疫缺陷性疾病也有一定療效。
主要用于治療慢性乙型肝炎、丙型肝炎、流行性出血熱、尖銳濕疣、毛細(xì)胞白血病、小兒嬰幼兒病毒性肺炎、子宮頸炎、皰疹性角膜炎、帶狀皰疹、流行性腮腺炎等疾病。如與化療、放療配合治療腫瘤，可改善患者血象和全身癥狀。
本品用1～2ml滅菌注射用水溶解。可肌內(nèi)注射或病變局部使用。肌內(nèi)注射，每日1～2次，每次一支，連續(xù)5～10天為一療程，每療程間隔2～3天，或遵醫(yī)囑。
1.對(duì)雞蛋過敏者忌用。
2.注射本品后，一般無反應(yīng)，個(gè)別患者注射后有低熱反應(yīng)或不同程度不適，停藥后即可消失。
3.如安瓿有裂紋或溶解后有搖不散的顆粒，不可使用。
應(yīng)保存于10℃以下暗處。
聯(lián)系方式
郵件：xiangyi@xiangyilxj.com
